組織細胞化学法は、標的となる蛋白・糖質・脂質などの局在と機能を組織切片上でとらえるために、細胞組織内で速やかに生体内物質を保存して、移動と流出を少なく留め（固定）、その後に免疫染色法等で可視化する方法です。しかし細胞内シグナル伝達分子の局在や構造変化などを検討する際、これら観察試料が生体内機能状態を反映しているかを考慮すると、適切な試料作製法の選択が重要と思われます。本講演では、とくに“凍結固定法” の長所である(1)瞬時の細胞組織形態の保存、(2)可溶性物質局在の保存（凍結置換固定やレプリカ法との併用）、(3)“氷晶形成”による免疫染色性の増強を概説し、さらに“生体内凍結技法”や“クライオ生検法”による血行動態が維持された動物臓器組織の機能形態学的特徴や生理的機能分子局在の解析応用を供覧しながら、「形態と機能」を直接結び付ける“新しいイメージング法”について詳細に解説します。