FACSCalibur
フローサイトメトリー：FACSCalibur 4A （analyzer）
BD FACSCaliburは、高性能4カラーベンチトップ型解析専用フローサイトメトリーシステムです。コンパクトで操作が簡単なBD FACSCaliburにより、細胞表面抗原解析、細胞周期解析、アポトーシス解析などの従来からの研究手法を迅速に行うことができます。加えて、遺伝子発現解析、マルチカラー解析、細胞内抗原をはじめとするタンパク質解析など、精巧な技術を要する細胞工学分野の研究にも広く用いられています。電源投入からわずか10分で解析が可能なため、FCMの入門機・解析専用機として使われています。
基本SPEC
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Function
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内 容
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ソーティング
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不可能
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光軸調整
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不要
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難易度
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容易
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レーザー
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Excitation wave
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搭載レーザー
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488nm
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空冷アルゴンレーザー
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635nm
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半導体赤色レーザー
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検出器
蛍光色素は一つの検出器につき、一種類だけ検出可能です。例えば、FITCとAlexa 488を同時に染色しても見分ける事ができません。すなわちFACSCaliburでは4色まで同時に解析が可能です。なお、色素によっては蛍光発光が他の検出器でも検出される場合があるため、測定時に調整が必要です（コンペンゼージョン）。
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Excitation wave
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検出器
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Emission
wave range |
fluoro-chrome
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Note
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488nm
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FSC
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488±10 nm
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散乱光
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大きさ |
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SSC
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488±10 nm
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散乱光
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内部構造 | |
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FL1
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530/±30 nm
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FITC
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Alexa 488
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invitrogen | |||
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CFSE
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細胞分裂解析 | |||
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EGFP
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FL2
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585±42 nm
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PE
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R-phycoerythrin (R-PE) 。 | |
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PI
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DNA解析 | |||
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FL3
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670 nm LP
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PerCP
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7AAD
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DNA・アポトーシス解析用 | |||
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PE-Cy5
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PE と cyanine色素を組み合わせたタンデム蛍光色素。 | |||
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PerCP-Cy5.5
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PerCPとcyanine色素（Cy5.5™）を組み合わせたタンデム蛍光色素。 | |||
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PE-Alexa 647
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invitrogen | |||
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PE-Alexa 680
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invitrogen | |||
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PE-Alexa 700
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invitrogen | |||
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PE-Alexa 750
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invitrogen | |||
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PE-Cy7
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635nm
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FL4
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661±16 nm
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APC
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Alexa 647
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invitrogen | |||
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DilC1(5)
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invitrogen |
注意1：BD Fluorescence Spectrum Viewerを使うと、当該機器で使用可能な色素を調べる事ができます。
注意2：蛍光色素にはいくつかの種類の細胞へ結合しやすいものがあり、Cy3、Cy5、 Cy5.5、Cy7およびTexas Redで直接的に抗体に標識されたもの、タンデム色素標識の一部はその傾向がある。Cy5はFcレセプターに低い親和性をもち、PE-Cy5タンデム色素も同様な特性があるのでMonocyte系の細胞の染色時は注意。 Cy5.5もFcレセプターに低い親和性をもつが、PerCP-Cy5.5タンデム色素は同様な特性をもっていない。
注意3：PE-Cy5、PE-Cy7、PE-TR、PerCP-Cy5.5、APC-Cy7などタンデム色素を使用する時は注意が必要。タンデム色素とは2つの蛍光タンパクがカップリングした色素で、 1つがレーザー光を吸収し、もう片方の色素にそのエネルギーを伝達する。例えば、PE-Cy5の場合488 nmのレーザーの 吸収をPEが行ない、Cy5がそのエネルギーを受け取り、Cy5の蛍光特性により蛍光を発する。 通常はレーザー光を受け取る蛍光色素そのものより明るくなるが、潜在的に蛍光波長がわずかに変動する可能性 があり、またロットごとに蛍光オーバーラップが異なる。2本以上のレーザーを使用する場合、2本目以降のレー ザーで励起されないかどうか確認することが必要。
ワークステーションSPEC
Apple PowerMacG5 2GHz Dual
Dell 24 inch 液晶モニター
OS
MacOS X Tiger 10.4
Software
CellQuestPro
FACSComp
ModFit LT for Mac V3.0
Synchronize! Pro X
Automator
使用可能Media
USB Memory
MO (〜1.3GB)
CD-R
CD-RW
DVD-R
Network
Posted by fcm : 2007年10月16日 20:49 | コメント (0) | トラックバック (0)
